Verfahren zum Nachweis von Einzelnukleotid-Polymorphismen (SNP) in Genen des Arzneimittelmetabolismus und Testkit zur Durchfuehrung des Verfahrens

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Item Type:	Patent
Title:	Verfahren zum Nachweis von Einzelnukleotid-Polymorphismen (SNP) in Genen des Arzneimittelmetabolismus und Testkit zur Durchfuehrung des Verfahrens
Creators Name:	Neunaber, R., Strohner, P., Schreiber, J., Voigt, G. and Schunck, W.H.
Abstract:	Die Erfindung betrifft ein vereinfachtes Verfahren zum Nachweis von SNP in Cytochrom P450 (CYP)-Genen des Menschen und ein Test-Kit mit folgenden Komponenten: 1. neu entwickelte synthetische Oligonukleotide, die geeignet sind, Genabschnitte in Genen des Arzneimittelmetabolismus mit Hilfe der 'DNA Polymerase Chain Reaction'-Technologie (PCR) isoformspezifisch (IS-PCR) aus genomischer Leukozyten-DNA zu amplifizieren, 2. Komponenten, die es ermoeglichen, einzelstraengig biotinierte IS-PCR-Produkte auf Streptavidin beschichteten Mikrotiterplatten (SA-MTP) selektiv, thermostabil und einzelstraengig zu immobilisieren, 3. testoptimierte, allelspezifische, Fluoresceinisothiocyanat (FITC) markierte synthetische Oligonukleotide, die durch Hybridisierung, nachfolgende stringente Waschung und anschliessende Detektion mittels Fluorometrie bzw. Photometrie eine sichere Genotypisierung der immobilisierten Amplifikationsprodukte (Amplikons) gewaehrleisten, oder alternativ dazu 4. Streptavidin beschichtete Glasobjekttraeger (SA-Chip), auf denen biotinierte, isoformspezifische, synthetische Oligonukleotide immobilisiert sind, welche mit partiell einzelstraengigen PCR-Produkten hybridisiert werden, die durch diskriminierende Verlaengerung eines allelspezifischen, endstaendig FITC-markierten Oligonukleotides mittels Taq DNA-Polymerase erzeugt wurden und durch nachfolgende stringente Waschung und anschliessende Detektion mittels Fluorometrie bzw. Photometrie eine sichere Genotypisierung der ...
Date:	4 March 2004

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